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  • 服务热线

    +8610-84928167

    扩繁

    目前小鼠品系已达上万种,大鼠品系也超过上千种,这些品系的繁殖性能千差万别,需要根据具体品系的特点,针对性的优化种群管理方案。依托20年的大小鼠种群管理经验和完善的动物设施质控体系,维通达可以根据客户需要,制定合适的扩繁方案,提供品系建立、常规扩繁、快速扩繁和活体保种等专业服务。

     

    1. 品系建立

    大小鼠,按照育种方式不同,分为近交系和封闭群。JAX将遗传背景不清楚的;或者首建鼠(Founder)来源于3种或以上品系;或者首建鼠是远交系(Outbred),统称为群(STOCK)。比如,STOCK按照全同胞兄妹交配20代之前,仍称为STOCK;兄妹交配20代之后,称为近交系(Inbred)。


    术语

    定义和说明

    STOCK(群)

    一个独立的繁育群体。

    Line(系)

    谱系明确的一群动物,且来源于同一父母。

    Inbred strain(近交系)*

    至少连续20代兄妹交配培育而成的品系。所有动物都可追溯于同2只首建鼠。

    Subline(亚系)

    按照近交系标准独立于原近交系繁育的一群小鼠。如许多常见近交系的亚系(C57BL/6J,   C57BL/6N)。

    Coisogenic(同类系)

    有一个基因改变的近交系。如许多在近交系上进行基因修饰操作后获得的品系。

    Inbred substrain(近交亚系)*

    按照近交系标准繁育20代的亚系,或者已经明确与近交系的遗传区别(甚至是1个基因的区别)。

    对于随机转基因和CRISPR技术产生的敲除鼠,由于插入位点/删除碱基数/拷贝数的不同,每一只founder(F0)的基因和表型可能不同。维通达可以为客户提供标准的品系建立服务,筛选到符合实验需要的基因编辑模型(品系,见下图,源于JAX)。


     image.png


    2. 快速扩繁

    采用超数排卵的方法获得卵母细胞,通过新鲜或冷冻精子进行体外受精(IVF),将2-cell时期的受精卵胚胎移植到代孕小鼠体内,一代获得大量子代小鼠的过程。


    image.png


    (1) 快速扩繁服务优点:

    -只需要提供精子或少量雄性小鼠;

    -6~12周即可提供大量同批次后代;

    -基因敲除或CKO小鼠繁育周期缩短30~50%。


    序号

    仔鼠数量

    快速扩繁时间

    传统扩繁时间

    1

    30只后代

    6周

    24周

    2

    50只后代

    6~8周

    24周

    3

    100只后代

    8~10周

    32周

    4

    150只后代

    8~12周

    40周

    5

    200只后代

    8~12周

    46周

    *数据源于B6背景小鼠


    (2)科学经济扩繁方案制定:

    按照计划扩繁,获得足够数量的大小鼠模型,是确保实验进行的前提。维通达主要依据大小鼠的扩繁性能和行业认可的扩繁性能计算公式,制定科学经济的扩繁方案。

    (1)基本生理参数:

    -小鼠6~8周左右性成熟,大鼠8~10周左右性成熟

    -小鼠孕期约3周(19~21天);大鼠孕期约3.2周(22~25天)

    -首胎间隔4~6周。

    -小鼠传一代需要3个月左右。

    (2)影响扩繁速度的雌雄鼠因素:

    ①雄鼠,精子数量多,只要具有受精能力,一般不是限速因素;

    ②雌鼠,孕期3周,哺乳3~4周,窝间隔一般1.5~2个月,常常是限速因素。

    (3)基因型杂合鼠的快速扩繁

    使用基因阳性的雄鼠,与同背景的野生雌鼠卵(超排获得卵)作IVF快速扩繁,2个月左右即可获得100只以上的后代(根据实验需要,移植对应数量的受精卵2-cell期胚胎)。

    (4)基因型纯合的快速扩繁

    如果有大量的纯合基因阳性雌鼠,可以直接自然扩繁或作IVF扩繁。一般情况下没有纯合或杂合的基因阳性雌鼠,只能使用野生型雌鼠超排,作IVF获得F1杂合后代;然后到F2代才能获得纯合鼠。

    (5)多基因快速扩繁

    由于快速扩繁,依赖于订购大量的野生型同背景雌鼠获取卵进行IVF,即在1代时间内可以获得大量的杂合小鼠。对于多基因扩繁,情况会比较复杂多样,会根据客户需求(时间和成本),提供适合的方案。


    3.活体保种

    若短时间内不用大小鼠模型,也可以小规模的活体保种。根据发育性能,基因型,繁育周期,进行科学的留种和换种计划,避免出现不育,以最小的笼位数维持种群。一般小鼠2~4笼;大鼠3~5笼进行活体保种。


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