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    HBV小鼠

    1. 基本信息

    品系名称:B6-Tg (HBV)5 Vst /Vst

    常用名C57BL/6-HBV; HBV 转基因小鼠

    背景C57BL/6NCrl

    毛色黑色


    品系建立

    将1.28倍长度的HBV(A型,GenBank: AF305422.1) 线性化片段注入C57BL/6NCrl小鼠胚胎原核,获得转基因阳性小鼠。通过外周血HBV拷贝数分析,保留了拷贝数达到108 IU/ml的首建鼠。按照半合子配野生C57BL/6NCrl小鼠的方式建立了HBV转基因小鼠品系。


    2. 表型分析

    (1)外周血中人乙肝e抗原,乙肝表面抗原和外周血HBV病毒拷贝数分析表明,雌鼠和雄鼠均有较高水平的表达。

    性别

    数量

    平均值

    体重(g)

    HBeAg(COI)

    HBSAg(COI)

    HBV-DNA(IU/ml)

    70

    17.99

    495.21

    5.80E+04

    5.25E+07

    70

    22.13

    846.61

    1.29E+05

    6.77E+07



    HBV DNA数据散点图(平均值为5.25E+07)

     5dca2434f29d9.png        

    图1  5~8周龄HBV小鼠外周血中HBV病毒拷贝数分析。



    ②HBeAg(COI) 数据散点图(平均值为495.21)

    5dca24484e391.png

    图2  5~8周龄HBV小鼠外周血中e抗原HBeAg(COI)分析。


    (2)不同月龄HBV小鼠肝脏、脾脏大体观(Chin Hepatol, 2018, 23(1): 26-30)

    5dca2454474dc.png

    图3 不同月龄HBV小鼠肝脏、脾脏大体观。



    (3)不同月龄HBV小鼠肝体比、脾体比,差异不显著(Chin Hepatol, 2018, 23(1): 26-30)

    5dca246984d19.png

    图4 不同月龄HBV小鼠肝体比、脾体比。



    (4)采用HBV Tg小鼠和CCL4诱导结合,可以成功建立乙肝肝纤维化小鼠复合模型(参见Acta Lab Anim Sci Sin,2019,27(5))。

          5dca247d70994.png

    图5  6种小鼠模型肝组织病理HE、天狼猩红染色与胶原半定量分析。A. 肝组织病理HE、天狼猩红染色;B. 胶原染色半定量分析;**P < 0.01 vs WT,▲▲P < 0.01 vs rAAV+CCl4,n = 5。(参见Acta Lab Anim Sci Sin,2019,27(5))。


    研究数据表明HBV Tg 小鼠在联合CCl4 染毒12 周后能够稳定成模。合理地选用小鼠慢性乙肝模型可以有效解决HBV 在病毒感染、复制、免疫应答和药物评价方面的难题。



    3. 应用领域

    高水平表达HBV病毒的小鼠模型,为研究病毒和宿主因素影响HBV复制、发病基因和生理学过程提供了部分可能性;为控制HBV复制研究,提供了稳定可遗传的小动物模型。

    该模型可用于研究HBV、治疗药物和疫苗及更下游的慢性肝炎和纤维化(结合化学诱导)。



    4. 注意事项

    (1)因为B6背景雄鼠大于6周龄后极容易发生咬架打斗情况,为避免意外发生,建议单只单笼饲养和实验。若实验空间紧张,建议选择雌鼠进行实验。

    (2)根据卫生部文件《人间传染的病原微生物名录》,HBV属于第三类病毒,需要在ABSL-2(BSL-2)设施进行实验。

    (3)为了确保安全,建议接种HBV疫苗后,HBV抗体阳性的人员,才能接触该动物进行实验和实验。

    (4)实验小鼠、排泄物、垫料和相关设施,按照ABSL-2(BSL-2)要求进行处理。



    5. 参考文献

    (1)LG Guidotti, B Matzke, HSchaller and F V Chisari. J. Virol. 1995, 69(10):6158.

    (2)J. Ren, L.Wang, Z. Chen, et al. Journal of Medical Virology 78:551–560 (2006).

    (3)黄恺, 孙鑫, 赵志敏,等. 两种乙肝肝纤维化小鼠复合模型的比较[J]. 中国实验动物学报,2019,27(5).Huang K,Sun X,Zhao ZM, et al. Comparison of two composite mouse models of hepatitis B fibrosis. Acta Lab Anim Sci Sin,2019,27(5).

    (4)孙鑫,黄恺,赵志敏,等. C57BL/6N-Tg(1.28HBV)/Vst 乙肝病毒转基因小鼠肝脏炎症与纤维化的病理特点. 肝脏,2018, 23(1): 26-30. Sun X,Huang K,Zhao ZM, et al. Pathological features of liver inflammation and fibrosis in hepatitis B virus transgenic mice C57BL/6N -Tg(1.28HBV) /Vst [J]. Chin Hepatol, 2018, 23(1): 26-30.



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